clickchemistrytools  1498-25說明書

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clickchemistrytools 二硫化物生物素炔烴說明書

clickchemistrytools 1498-1

Disulfide Biotin Alkyne

分子量

647.87

剩余分子量

143.20

化學(xué)成分

第二季度

CAS

不適用

溶解性

玻璃狀無定形固體

外貌

黃色無定形固體至黃色油

儲(chǔ)存條件

-20°C。

裝運(yùn)條件

環(huán)境溫度

鏈霉親和素-生物素相互作用的非凡強(qiáng)度允許有效捕獲甚至高度稀釋的目標(biāo)；然而，這使得從親和樹脂中回收蛋白質(zhì)具有挑戰(zhàn)性。從固定化抗生物素中洗脫生物素化蛋白質(zhì)的常規(guī)方法包括：（i）通過在變性緩沖液中煮沸樹脂使鏈霉親和素變性，變性緩沖液可能包括高濃度的離液鹽；（ii）蛋白質(zhì)與樹脂結(jié)合時(shí)胰蛋白酶消化；或（iii）用過量游離生物素洗脫蛋白質(zhì)。這些方案可以通過與標(biāo)記的蛋白質(zhì)同時(shí)釋放非特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)和/或天然生物素化的蛋白質(zhì)來共同洗脫污染物蛋白質(zhì)。此外，這些方法中的一些可能導(dǎo)致高水平的樹脂基肽與感興趣的蛋白質(zhì)一起洗脫，導(dǎo)致進(jìn)一步的樣品污染。

二硫化物生物素炔探針消除了鏈霉親和素-生物素親和純化的主要限制。該試劑包含一個(gè)生物素部分，該生物素部分通過含有可裂解的二硫鍵的間隔臂與炔基連接。捕獲的生物分子可在溫和條件下（50mM二硫蘇糖醇、10mM 2-巰基y醇或1%硼氫化納）和切割后留在標(biāo)記蛋白上的小分子片段（143.20Da）有效釋放。這些特征使得可裂解探針在生物分子標(biāo)記和蛋白質(zhì)組學(xué)研究中特別有吸引力。