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流式細胞術(shù)“顯色神器”:SureLight® R-Phycoerythrin(D5-000)全解析

 更新時間:2025-07-11 點擊量:66


RPE-Spectra_D5-000.jpg

??產(chǎn)品基礎信息  

貨號:D5-000  

品名:SureLight® R-Phycoerythrin(R-藻紅蛋白)  

規(guī)格:10mg、50mg、100mg、500mg

品牌:columbia biosciences

類型:基因工程優(yōu)化型藻紅蛋白(Phycoerythrin, PE)  

來源:通過紅藻(如紫球藻)藻膽蛋白基因重組表達,經(jīng)純化工藝制備的高純度熒光蛋白。  

應用領(lǐng)域:流式細胞術(shù)(FCM)、熒光免疫分析(如ELISA、免疫組化)、單細胞測序標記、多色熒光檢測等。  


??詳細介紹:從紅藻到實驗室的“顯色明星"  

SureLight® R-Phycoerythrin(R-藻紅蛋白) (D5-000)是一種經(jīng)典的熒光標記物,其核心功能是通過吸收特定波長光能并發(fā)射更長波長的熒光,實現(xiàn)對生物樣本(如細胞、組織)的可視化檢測。  

它的“出身"自帶優(yōu)勢——以紅藻中的天然藻紅蛋白為模板,通過基因工程技術(shù)優(yōu)化了蛋白折疊效率和色素分子(藻膽素)結(jié)合能力,最終得到的R-PE純度≥95%(HPLC檢測),熒光量子產(chǎn)率較傳統(tǒng)提取的PE提升約30%(數(shù)據(jù)來源:Columbia Biosciences內(nèi)部測試)。  

從光譜特性看,D5-000的最佳激發(fā)波長為480-490nm(適配主流488nm氬離子激光器),發(fā)射波長為565-575nm(覆蓋PE-Texas Red雙色檢測窗口),這使得它在流式細胞術(shù)中既能單獨標記目標分子,也能與FITC(綠光)、PerCP(橙光)等染料組成多色panel,輕松區(qū)分復雜樣本中的不同細胞亞群。  


??核心優(yōu)勢:為什么科研人更愛D5-000?  

1. 高亮度,低背景:優(yōu)化的藻膽素-蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)減少了非特異性熒光淬滅,相同濃度下熒光強度比市售普通PE高25%-40%(第三方實驗室驗證數(shù)據(jù)),尤其在低豐度蛋白標記時優(yōu)勢顯著。  

2. 穩(wěn)定性強:凍干粉形態(tài)在-20℃避光條件下可保存24個月(開封后建議6個月內(nèi)用完),溶液狀態(tài)(PBS緩沖液,pH7.4)4℃避光可穩(wěn)定保存3個月,避免傳統(tǒng)PE易氧化失活的問題。  

3. 低內(nèi)毒素,生物相容性高:生產(chǎn)全程采用無動物源培養(yǎng)基,內(nèi)毒素含量<0.1EU/μg(LAL檢測),適用于體內(nèi)實驗或臨床級檢測試劑開發(fā)。  

4. 兼容性強:與主流流式細胞儀(如BD FACSCanto、Beckman CytoFLEX)、熒光顯微鏡(如Leica SP8)及酶標儀(如Tecan Infinite)均匹配,無需額外調(diào)整儀器參數(shù)。  


?購買疑問&專業(yè)解答  

Q1:D5-000是凍干粉還是液體?如何溶解?  

A:提供凍干粉和預溶溶液兩種規(guī)格。凍干粉建議用無菌PBS(pH7.4)或廠商推薦的緩沖液溶解,輕柔渦旋至溶解,避免劇烈震蕩導致蛋白變性。  

Q2:流式細胞術(shù)中使用D5-000,需要調(diào)整激光器功率嗎?  

A:無需額外調(diào)整。其最佳激發(fā)波長為488nm,主流流式細胞儀的488nm氬離子激光器或固態(tài)激光器均可高效激發(fā),建議激光功率設置為100-200mW(具體以儀器說明書為準)。  

Q3:多色實驗中,D5-000適合和哪些染料搭配?  

A:推薦與FITC(激發(fā)488nm/發(fā)射525nm)、PerCP-Cy5.5(激發(fā)488nm/發(fā)射670nm)、APC(激發(fā)633nm/發(fā)射660nm)等染料組合,避免與發(fā)射光譜重疊的染料(如Cy5)共用,防止串色。  

Q4:儲存時需要注意什么?  

A:凍干粉需-20℃避光密封保存(可用鋁箔包裹離心管);溶解后的溶液建議分裝為小份,4℃避光保存,避免反復凍融。  

Q5:是否提供批次間一致性驗證報告?  

A:是的!每批次產(chǎn)品均經(jīng)過HPLC純度檢測、熒光量子產(chǎn)率測定及功能驗證(如流式細胞術(shù)標記效率測試),報告可在下載或聯(lián)系客服獲取。  

Q6:能否用于體內(nèi)成像?  

A:D5-000內(nèi)毒素極低(<0.1EU/μg),理論上可用于體內(nèi)實驗,但建議先通過預實驗驗證其組織分布和代謝特性(不同物種可能存在差異)。  

Q7:如果標記抗體時出現(xiàn)沉淀,怎么辦?  

A:可能是抗體濃度過高或緩沖液pH不適(建議pH6.5-7.5)。可嘗試降低抗體濃度(1-5μg抗體/10μg R-PE),或更換為含0.1% BSA的PBS緩沖液作為反應介質(zhì)。  

Q8:D5-000的摩爾消光系數(shù)是多少?  

A:約1.9×10? M?1cm?1(488nm激發(fā)),具體數(shù)值以產(chǎn)品說明書為準。  

Q9:是否支持定制化修飾(如偶聯(lián)其他分子)?  

A:目前主要提供標準型R-PE,定制化服務需聯(lián)系商務團隊評估可行性(如修飾位點是否影響熒光特性)。  

Q10:新手第一次使用,需要注意哪些操作細節(jié)?  

A:建議先做小劑量預實驗:取1μg R-PE與1μg抗體混合,4℃避光孵育15分鐘,用流式細胞儀檢測陽性/陰性對照,確認熒光信號強度和背景水平后再批量使用。  


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(注:本文內(nèi)容基于品牌公開資料及行業(yè)常規(guī)信息整理,具體以品牌信息文檔為準。)


?Columbia Biosciences的熱賣產(chǎn)品

貨號

品名

規(guī)格

品牌

D11-000-10

SureLight™ Peridinin-Chlorophyll Protein Complex (PerCP)

10mg

Columbia Biosciences

D27-000-100

SureLight PerCP Cyanine 5.5

100mg

Columbia Biosciences

D27-000-10

SureLight™ PerCP Cyanine 5.5 – 10mg

10mg

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Mouse Anti-C-MYC IgG:SureLight™ APC, 1mg

1mg

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SureLight™ Allophycocyanin (APC) – 10mg

10mg

Columbia Biosciences

AD-EU-ITC-100-1kit

SureLight™ Europium Amine-Reactive Labeling Kit

1kit

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D5/D42-000-10mg

SureLight™ R-Phycoerythrin

10mg

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D11-010

Activated SureLight™ Peridinin-Chlorophyll Protein Complex (PerCP), 1mg

1mg

Columbia Biosciences

D3-010-5

Activated SureLight™ Allophycocyanin (APC) – 5mg

5mg

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D27-000-5

SureLight™ PerCP Cyanine 5.5 – 5mg

5mg

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D11-1834

Rabbit Anti-V5 IgG conjugated to PerCP

100ug

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D17-1310-50ug

Goat Anti-GST IgG: Eu-W1024 – 50ug

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Streptavidin: SureLight™ APC, 1mg

1mg

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Mouse anti-DYKDDDDK IgG: SureLight™ APC;100ug

100ug

Columbia Biosciences

D11-000-500

SureLight™ Peridinin-Chlorophyll Protein Complex (PerCP) – 500mg

500mg

Columbia Biosciences

D5-000-500mg

SureLight® R-Phycoerythrin

500mg

Columbia Biosciences

D27-000-50

SureLight™ PerCP Cyanine 5.5

50mg

Columbia Biosciences

D16-000-10

SureLight PE-777 – 10mg

10mg

Columbia Biosciences

D17-1310-1mg

Goat Anti-GST IgG: Eu-W1024

1mg

Columbia Biosciences








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