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上皮細胞組織消化手冊

 更新時間:2016-02-16 點擊量:1429

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Worthington組織消化指南

引言

組織消化酶主要用于組織培養(yǎng)和細胞生物學研究的原代細胞的分離和收集。盡管這些消化酶已經(jīng)普遍應(yīng)用多年,但是對其組織消化和細胞收集的作用機制卻沒有全面的理解。  由此導致的結(jié)果便是選擇一種消化方法大多是隨機選擇或基于過去的經(jīng)驗,而不是在*理解消化原理的基礎(chǔ)上選擇的消化方案,以及如何根據(jù)具體實驗?zāi)康男拚桨敢垣@得更好的實驗結(jié)果。

細胞分離程序的目的是zui大程度的獲得功能活性的單個細胞,而影響結(jié)果的原因有很多,包括(不限于)以下:

1、組織類型

2、物種來源

3、動物年齡

4、遺傳改造情況(如knockouts

5、所用的消化培養(yǎng)液

6、所用的酶

7、消化酶中的雜質(zhì)

8、所用消化酶的工作濃度

9、溫度

10、孵育時間

通常前四個原因沒辦法選擇,而剩下的原因一般由經(jīng)驗決定以獲取zui適實驗結(jié)果。

通過查閱文獻來選擇*組織消化酶和zui適消化條件的研究人員通常被互相矛盾的實驗數(shù)據(jù)搞得一頭霧水。這些巨大差異來源于組織胞外基質(zhì)的復(fù)雜而動態(tài)的特性,以及過去常用的粗制、未提純的組織分離酶。另外,組織胞外基質(zhì)由各種蛋白、糖蛋白、脂類和糖脂組成,這些成分的組成比例在不同物種、不同組織、甚至不同發(fā)育(年齡)之間存在明顯的差異,這些因素都極大的影響了消化方案的制定。目前通常使用的粗制酶,如鏈霉蛋白酶、NF1:250、以及含有幾種其他不同濃度蛋白酶的膠原酶、以及各種多糖酶、核酶和脂酶。

本指南總結(jié)了目前常用組織消化酶的zui適消化和細胞收集知識和方法,描述了標準的實驗步驟, 便于制定一個*的細胞分離方案,同時列舉了一些相關(guān)的參考文獻。

下表列出多種組織的適宜消化酶(含參考文獻,以組織類型和物種分類,詳見鏈接)

脂肪組織

腎上腺組織

骨組織

腦組織

軟骨組織

結(jié)腸組織

內(nèi)皮組織

上皮組織

心臟

淋巴結(jié)

乳腺

其它組織

其他組織

肌組織

神經(jīng)組織

胰腺

腮腺

垂體

前列腺

生殖

動物鱗片

皮膚

脾臟

干細胞

胸腺

甲狀腺/甲狀旁腺

扁桃體

腫瘤

 

 

 

注:使用Worthington公司消化酶的文獻不限于上表鏈接中所列,一般而言,Worthington公司的組織消化酶可用于大多組織類型的消化。

 

上皮細胞組織消化手冊

 

物種詳細來源細胞名稱消化用酶培養(yǎng)基參考文獻
牛, fetalEpithelialNeutral Protease: 2%Dissociation medium, CMFSchumann, B.L., Cody, T.E., Miller, M.L., Leikauf, G.D.: Isolation, Characterization, and Long-Term Culture of Fetal Bovine Tracheal Epithelial Cells, In Vitro Cell Dev Biol 24, 211, 1988
Tracheal
TrachealPronase: 0.1%DMEMVirmani, A., Naziruddin, B., Desai, V., Lowry, J., Graves, D., and Sachdev, G.:Evidence for Secretion of High Molecular Weight Mucins by Canine Tracheal Epithelial Cells in Primary Culture: Effects of Select Secretagogues on Mucin Secretion, In Vitro Cell Dev Biol 28A, 120, 1992
小雞, 5 天大Intestinal mesenchymal and epithelialCollagenase: 0.03%DMEMSimon-Assmann, P and Kedinger, M: Embryonic Gut-Dissagregated Culture,Cell & Tissue Culture: Laboratory Procedures Vol. 1,Doyle, A., Griffiths, J., and Newell, D., John Wiley and Sons, Ltd., 12A:3.1, 1995
鯊魚(海綠角鯊)Rectal glandCollagenase: 0.2%Ringer's solutionKarnaky, Jr., K.J., Valentich, J.D., Currie, M.G., Oehlenschlager, W.F., and Kennedy, M.P.: Atriopeptin Stimulates Chloride Secretion in Cultured Shark Rectal Gland Cells, Am J Physiol 260, 1125, 1991
鯊魚(海綠角鯊)Rectal glandCollagenase: 0.2%Ringer's solutionValentich, J: J Tiss Cul Meth 13, 149, 1991
美洲擬鰈, 200-500 克Renal tubuleTrypsin: 0.2%CMF solutionDickman, K.G., and Renfro, J.: Primary Culture of Flounder Renal Tubule Cells: Transepithelial Transport, Am J Physiol 251, 424, 1986
(黃蓋美洲)
青蛙青蛙, 有爪蟾蜍, 成年的, 雌性Colonic epithelialCollagenase Type 4: 0.1%Kreb'sHeinke, B, and Clauss, W.: Potassium Conductances in Isolated Single Cells fromXenopus Laevis Colonic Epithelium, J Comp Physiol [B] 169, 148, 1999
豚鼠Hartley豚鼠, 雌性, 200 克EpithelialCollagenase Type 1: 0.1%DMEMRutten, M.: Use of Commerically Available Cell Culture Inserts for Primary Culture and Electrophysiologic Studies of Guinea Pig Gastric Mucous Epithelial Cells, J Tiss Cul Meth 14, 235, 1992
豚鼠豚鼠, 哈特利白化,EndometrialCollagenase: 0.25%HBSSChaminadas, G., Alkhalaf, M., Remy-Martin, J.P., Propper, A.Y., and Adessi, G.L.: Specific Effect of Oestrone Sulphate on Protein Synthesis and Secretion by Cultured Epithelial Cells from Guinea-pig Endometrium, J Endocrinol 123, 233, 1989
500-600 克
倉鼠倉鼠, 敘利亞黃金, 雄性, 100-120 克TrachealPronase: 0.1%MEM with Hepes, CMFNiles,R., Kim, K.C., Hyman, B., Christensen, T., Wasano, K., Brody, J.:Characterization Of Extended Primary And Secondary Cultures Of Hamster Tracheal Epithelial Cells, In Vitro Cell Dev Biol 24, 457, 1988
倉鼠倉鼠, 敘利亞黃金 (鉻:RGH應(yīng)變)TrachealTrypsin: 0.1%Ham's F-12McDowell, E., et al.: Differentiation of Tracheal Mucociliary Epithelium in Primary Cell Culture Recapitulates Normal Fetal Development and Regeneration Following Injury in Hamsters, Am J Pathol 129, 511, 1987
倉鼠倉鼠 (血統(tǒng)1516 EHS 和 萊克維尤), 8-12 周TrachealTrypsin: 0.05%Medium 199Lee, T., Wu, R., Brody, A., Barrett, J., and Nettesheim, P.: Growth and Differentiation of Hamster Tracheal Epithelial Cells in Culture, Exp Lung Res 6, 27, 1984
倉鼠倉鼠,敘利亞黃金, 雄性, 6 周- 4 個月TrachealTrypsin: 0.25%PBS with EDTAGoldman, W.E., Baseman, J.B.: Selective Isolation and Culture of a Proliferating Epithelial Cell Population from the Hamster Trachea, In Vitro 16, 313, 1980
人類人類Human tracheal epitheliumProtease Type XIV: 0.04%DMEM/F12Widdicombe JH, Sachs LA, Morrow JL, and Finkbeiner WE.: Expansion of cultures of human tracheal epithelium with maintenance of differentiated structure and function, Biotechniques 39(2), 249, 2005
人類人類Colonic epithelialCollagenase: RPMI 1640Fukushima, K. and Fiocchi, C.: Paradoxical Decrease of Mitochondrial DNA Deletions in Epithelial Cells of Active Ulcerative Colitis Patients., Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 286, G804-13, 2004
Neutral Protease: 0.3%
Deoxyribonuclease I: 0.05%
人類人類Corneal limbal epithelial sheetNeutral Protease: 5%see referenceEspana EM, Romano AC, Kawakita T, Di Pascuale M, Smiddy R, and Tseng SC:Novel enzymatic isolation of an entire viable human limbal epithelial sheet, Inv Ophthal Visual Sci 44(10), 4275, 2003
人類人類Intestinal epithelialCollagenase Type 4: 72.5 u/mlHBSSFahlgren, A., Hammarstrom, S., Danielsson, A. and Hammarstrom, M.:Increased Expression of Antimicrobial Peptides and Lysozyme in Colonic Epithelial Cells of Patients with Ulcerative Colitis., Clin Exp Immunol 131, 90, 2003
人類人類Gastric epithelial cellsCollagenase Type 2: 200 u/mlL-15Smoot, D., Sewchand, J., Young, K., Desbrodes, B., Allen, C. and Naab, T.: A Method for Establishing Primary Cultures of Human Gastric Epithelial Cells,Meth Cell Sci 22, 133, 2000
Neutral Protease: 1.2 u/ml
Soybean Trypsin Inhibitor: 0.125%
人類人類GastricCollagenase Type 4: 0.01%F-12 mediumSarosiek, J, Marshall, B, Peura, D, Guerrant, L, McCallum, R and Little, C: The Isolation and Maintenance of Human Gastric Epithelial Cells in Primary Culture,Cell & Tissue Culture: Laboratory Procedures Vol. 1,Doyle, A., Griffiths, J., and Newell, D., John Wiley and Sons, Ltd., 12B:10.1, 1995
人類人類Nasal polyp epithelialNeutral Protease: .004%see referenceHalbert CL, Alexander IE, Wolgamot GM, Miller AD: Adeno-associated virus vectors transduce primary cells much less efficiently than immortalized cells, J Virol 69, 1473-9, 1995
Trypsin: 0.1%
人類人類EpithelialTrypsin: 0.05%DMEMSabatini, L., Allen-Hoffmann, B, Warner, T., and Azen, E.: Serial C*tion of Epithelial Cells from Human and Macaque Salivary Glands, In Vitro Cell Dev Biol27A, 939, 1991
人類人類EpithelialTrypsin: 0.2%MEM, PBSRobinson, C., and Wu, R.: Culture of Conducting Airway Epithelial Cells in Serum-Free Medium, J Tiss Cul Meth 13, 95, 1991
人類人類EpithelialCollagenase: 2.0%DMEM/Ham's F-12Emerman, J. and Wilkinson, D.: Routine Culturing of Normal, Dysplastic and Malignant Human Mammary Epithelial Cells from Small Tissue Samples, In Vitro Cell Dev Biol 26, 1186, 1990
人類人類EpithelialPronase: 0.1%PBSGruenert, D.C., Basbaum, C.B., and Widdicombe, J.H.: Long-Term Culture of Normal and Cystic Fibrosis Epithelial Cells Grown Under Serum-Free Conditions, In Vitro Cell Dev Biol 26, 411, 1990
人類人類EpithelialCollagenase Type 2: 0.2%(see reference)Wood, L. and Neufeld, E.: A Cystic Fibrosis Phenotype in Cells Cultured from Sweat Gland Secretory Coil. Altered Kinetics of 36Cl Efflux, J Biol Chem 265, 12796, 1990
Sweat gland
人類人類Endometrial epithelialTrypsin: DMEM/Ham's F-12Munson, L., Chandler, S., and Schlafer, D.: C*tion of Bovine Fetal and Adult Endometrial Epithelial Cells, J Tiss Cul Meth 11 (3), 129, 1988
(包括 牛)
人類人類EpithelialDeoxyribonuclease I: 0.01%HEPES with 5.9mM Glucose,5mM DTTWiddicombe, J.H., Coleman, D.L., Finkbeiner, W.E., and Tuet, I.K.: Electrical Properties of Monolayers Cultured From Cells of Human Tracheal Mucosa, J Appl Physiol 58, 1729, 1985
人類人類EpithelialProtease Type XIV: 0.1%Eagle's MEMYankaskas, J., Cotton, C., Knowles, M., Gatzy, J., and Boucher, R.: Culture of Human Nasal Epithelial Cells on Collagen Matrix Supports, Am Rev Respir Dis 132, 1281, 1985
人類人類,女人, 27-49 歲EpithelialTrypsin: 0.125%HBSS, CMFAuersperg, N., Siemens, C.H., and Myrdal, S.E.: Human Ovarian Surface Epithelium In Primary Culture, In Vitro 20, 743, 1984
Ovary
人類人類,嬰兒和新生兒EpithelialTrypsin: 0.1%HBSSLechner, J., Babcock, M., Marnell, M., Narayan, K., and Kaighn, M.: Normal Human Prostate Epithelial Cell Cultures, Methods Cell Biol 21, 195, 1980
Prostate
小鼠小鼠, 成年的Cilary epithelialPDS kit: per instructionsEBSSGualdoni, S., Baron, M., Lakowski, J., Decembrini, S., Pearson, R., Ali, R. and Sowden, J.: Isolation and Culture of Adult Ciliary Epithelial Cells, Previously Identified as Retinal Stem Cells, and Retinal Progenitor Cells., Curr Protoc Stem Cell Biol Chapter 1, Unit 1H.4, 2011
小鼠小鼠, 雄性, 8-16 周Renal tubular epithelialCollagenase: 200 u/mlHBSSBreggia, A. and Himmelfarb, J.: Primary Mouse Renal Tubular Epithelial Cells have Variable Injury Tolerance to Ischemic and Chemical Mediators of Oxidative Stress.,Oxid Med Cell Longev 1, 33, 2008
Soybean Trypsin Inhibitor: see reference
小鼠小鼠, 6-8 周Lamina propria mononuclear cellsCollagenase Type 2: 0.015%RPMIWirtz S., Becker C., Blumberg R., Galle P., and Neurath M.: Treatment of T cell-dependent experimental colitis in SCID mice by local administration of an adenovirus expressing IL-18 antisense mRNA, J Immunol 168(1), 411, 2002
Deoxyribonuclease I: 0.01%
小鼠小鼠, 11 周EpithelialCollagenase Type 3: 25 u/mlDMEM/F12Mueller, S., Clark, J., Myers, P. and Korach, K.: Mammary Gland Development in Adult Mice Requires Epithelial and Stromal Estrogen Receptor Alpha.,Endocrinology 143, 2357, 2002
Hyaluronidase: 0.1%
Protease XIV: 0.05%
Deoxyribonuclease I: 0.04%
小鼠小鼠, 雌性Salivary gland epithelialCollagenase Type 1: 750 u/mlDMEM/F12Ishimaru N, Saegusa K, Yanagi K, Haneji N, Saito I, Hayashi Y: Estrogen deficiency accelerates autoimmune exocrinopathy in murine Sjogren's syndrome through fas-mediated apoptosis, Am J Pathol 155, 173-81, 1999
Hyaluronidase: 500 u/ml
小鼠小鼠, 胎兒12-13 天Intestinal mesenchymal and epithelialCollagenase: 0.03%DMEMSimon-Assmann, P and Kedinger, M: Embryonic Gut-Dissagregated Culture,Cell & Tissue Culture: Laboratory Procedures Vol. 1,Doyle, A., Griffiths, J., and Newell, D., John Wiley and Sons, Ltd., 12A:3.1, 1995
小鼠小鼠Submandibular salivaryCollagenase Type 2 or 3: 0.16%DMEMDurban, E: Submandibular Salivary Epithelial Cells,Cell & Tissue Culture: Laboratory Procedures Vol. 1,Doyle, A., Griffiths, J., and Newell, D., John Wiley and Sons, Ltd., 12B:2.1, 1995
小鼠小鼠EsophagealTrypsin: 0.25%PBS, CMFKatayama, M., Kan, M.: Heparin-Binding (Fibroblast) Growth Factors re Potential Autocrine Regulators of Esophageal Epithelial Cell Proliferation, In Vitro Cell Dev Biol 27, 533, 1991
小鼠小鼠, 成年的, 雌性, 6-8周大UterineTrypsin: 0.2%HBSSGhosh, D., Danielson, K., Alston, J., and Heyner, S.: Functional Differentiation of Mouse Uterine Epithelial Cells Grown on Collagen Gels or Reconstituted Basement Membranes, In Vitro Cell Dev Biol 27A, 713, 1991
小鼠小鼠, 雌性, 18 - 20天UterineTrypsin: 0.25%HBSSFukamachi, H., and McLachlan, J.: Proliferation and Differentiation of Mouse Uterine Epithelial Cells in Primary Serum-Free Culture: Estradiol-17B Suppresses Uterine Epithelial Proliferation Cultured on a Basement Membrane-Like Substratum,In Vitro Cell Dev Biol 27A, 907, 1991
(包括 20 - 22 天)
小鼠小鼠, (白變種實驗室老鼠), 雄性, 3-5 月EpithelialCollagenase Type 3: 0.16% , 1:1 v/vDMEM with 15 mM HEPESDurban, E.M.: Mouse Submandibular Salivary Epithelial Cell Growth and Differentiation in Long-Term Culture:Influence of the Extracellular Matrix, In Vitro Cell Dev Biol 26, 33, 1990
Submandibular salivary gland
小鼠小鼠, 雌性EpithelialPepsin: 0.1%HBSSReiser, M., Huff, B., and Medina, D.: Pepsin Can be Used to Subculture Viable Mammary Epithelial Cells, In Vitro 19 (9), 730, 1983
小鼠小鼠, (白變種實驗室老鼠fC3H or白變種實驗室老鼠) 8-12 天中孕EpithelialCollagenase Type 3: 0.1%HBSSYang, J., Flynn, D., Larson, L., and Hamamoto, S.: Growth in Primary Culture of Mouse Submandibular Epithelial Cells, In Vitro 18, 435, 1982
Submandibular gland
小鼠小鼠 (白變種實驗室老鼠fC3H)Mammary tumorsCollagenase: 1.0%HBSSYang, J., Guzman, R., Richards, J., and Nandi, S.: Primary Cultures of Mouse Mammary Tumor Epithelial Cells Embedded in Collagen Gels, In Vitro 16, 502, 1980
Epithelial
小鼠小鼠, C3H, 6-8 周EpithelialCollagenase: 0.10%DMEMLillehaug, J., Mondal, S., and Heidelberger, C.: Establishment of Epithelial Cell Lines from Mouse Regenerating Liver, In Vitro 15, 910, 1979
豬, 5-60 公斤Retinal pigment epithelial cellsCollagenase: 2%DMEMWiencke, A., Kiilgaard, J., Nicolini, J., Bundgaard, M., Ropke, C., and La Cour, M.: Growth of Cultured Porcine Retinal Pigment Epithelial Cells, Acta Opthalmol Scand 81(2), 170, 2003
TracheaNeutral Protease: 0.2%HBSSDe Buysscher, E., Kennedy, J., and Mendicino, J.: Synthesis of Mucin Glycoproteins by Epithelial Cells Isolated from Swine Trachea by Specific Proteolysis, In Vitro 20, 433, 1984
兔, 新西蘭白, 成年的ColonNeutral Protease: 0.3%PBSVidrich, A., Racindranath, R., Farsi, K., and Targan, S.: A Method for the Rapid Establishment of Normal Adult Mammalian Colonic Epithelial Cell Cultures, In Vitro Cell Dev Biol 24 (3), 188, 1988
兔, 新西蘭白, 雄性, 4-5磅GastricCollagenase Type 2: 0.08%Sodium phosphate bufferChew, C.S., Brown,M.R.: Release of Intracellular Ca2+ and Elevation of Inositol Triphosphate by Secretagogues in Parietal and Chief Cells Isolated from Rabbit Gastric Mucosa, Biochim Biophys Acta 888, 116, 1986
Parietal and chief
兔, 新西蘭白 動情期的,雌性, 4-5 個月Mesothelial and surface epithelialTrypsin: 0.125%-0.5%Medium 199Nicosia, S., Johnson, J., and Streibel, E.: Isolation and Ultrastructure of Rabbit Ovarian Mesothelium(Surface Epithelium), Int J Gynecol Pathol 3, 348, 1984
Ovaries
兔, 胎兒的EpithelialCollagenase Type 3: 0.10%HBSSLogsdon, C.D., Bisbee, C.A., Rutten, M.J. and Machen, T.E.: Fetal Rabbit Gastric Epithelial Cells Cultured on Floating Collagen Gel, In Vitro 18, 233, 1981
Gastric
大鼠大鼠Mammary epithelialCollagenase Type 3: 0.35%HBSSMei, N., McDaniel, L., Dobrovolsky, V., Guo, X., Shaddock, J., Mitstaedt, R., Azuma, M., Shelton, S., McGarrity, L., Doerge, D. and Heflich, R.: The Genotoxicity of Acrylamide and Glycidamide in Big Blue Rats., Toxicol Sci 115, 412, 2010
大鼠大鼠, SD, 成年的,男性, 8-10 周大Seminiferous tubulesTrypsin: 0.05%Krebs-Ringer bicarbonate bufferAbou-Haila, A., and Tulsiani, D.: Acid Glycohydrolases in Rat Spermatocytes, Spermatids and Spermatozoa: Enzyme Activities, Biosynthesis and Immunolocalization, Biol Proced Online 3 (1), 35, 2001
(see reference)
大鼠大鼠, 男性Alveolar epithelialElastase: 40 u/mlDMEMPlanus, E., Galiacy, S., Matthay, M., Laurent, V., Gavrilovic, J., Murphy, G., Clerici, C., Isabey, D., Lafuma, C., and d'Ortho, M.: Role of Collagenase in Mediating in Vitro Alveolar Epithelial Wound Repair, J Cell Sci 112, 243, 1999
大鼠大鼠, 胚胎Tracheal epithelialCollagenase Type 4: 0.05%DMEM/F12Shannon JM, Gebb SA, and Nielsen LD: Induction of alveolar type II cell differentiation in embryonic tracheal epithelium in mesenchyme-free culture,Development 126, 1675, 1999
Neutral Protease: 
Deoxyribonuclease I: 
大鼠大鼠, fetal, 14-15 dayIntestinal mesenchymal and epithelialCollagenase: 0.03%DMEMSimon-Assmann, P and Kedinger, M: Embryonic Gut-Dissagregated Culture,Cell & Tissue Culture: Laboratory Procedures Vol. 1,Doyle, A., Griffiths, J., and Newell, D., John Wiley and Sons, Ltd., 12A:3.1, 1995
大鼠大鼠, 4-14 周Retinal pigment epithelial cellsCollagenase Type 1: 65 u/mlCF Hanks with EDTAWang N, Koutz CA, and Anderson RE.: A method for the isolation of retinal pigment epithelial cells from adult rats, Inv Ophthal Visual Sci 34(1), 101, 1993
Hyaluronidase: 220 u/ml
大鼠大鼠, SD, 成年的, 90-120 日大, 350-450克Epididymal epithelialCollagenase Type 2: 0.1%HBSSKlinefelter, G.: A Novel System for the Co-Culture of Epididymal Epithelial Cells and Sperm From Adult Rats, J Tiss Cul Meth 14, 195, 1992
大鼠大鼠, 6 天大Rat intestinal epithelialNeutral Protease: 0.01%DMEMEvans GS, Flint N, Somers AS, Eyden B, and Potten CS.: The development of a method for the preparation of rat intestinal epithelial cell primary cultures, J Cell Sci 101, 219, 1992
Collagenase: 300 u/ml
大鼠大鼠, SD, 雄性, 150 - 250克EpithelialPronase: 0.15%Medium 199Dial, E., Kao, Y., and Lichtenberger, L.: Effects of 16,16-Dimethyl Prostaglandin E2 On Glycoprotein And Lipid Synthesis of Gastric Epithelial Cells Grown in a Primary Culture, In Vitro Cell Dev Biol 27, 39, 1991
Stomach
大鼠大鼠, 成年的Interlobular duct fragmentsPapain: DMEM/Ham's F-12Heimann, T., and Githens, S.: Rat Pancreatic Duct Epithelium Cultured on a Porous Support Coated with Extracellular Matrix, Pancreas 6 (5), 514, 1991
(包括 倉鼠)
大鼠大鼠, SD, 200 克ColonDeoxyribonuclease I: 10 礸/ml(see reference)Yassin, R., Clearfield, H., Katz, S., and Murthy, S.: Gastrin Induction of mRNA Expression in Rat Colonic Epithelium In Vitro, Peptides 12, 63, 1991
大鼠Wistar大鼠,  新生的EpithelialTrypsin: 0.1%HBSSJassal, D., Han, R., Caniggia, I., Post, M., and Tanswell, A.: Growth of Distal Fetal Rat Lung Epithelial Cells in a Defined Serum-Free Medium, In Vitro Cell Dev Biol27A, 625, 1991
大鼠嚙齒目動物, 各種各樣的 (參考)EpithelialTrypsin: 0.2%MEM, PBSRobinson, C., and Wu, R.: Culture of Conducting Airway Epithelial Cells in Serum-Free Medium, J Tiss Cul Meth 13, 95, 1991
大鼠大鼠, 6-8 天Retinal pigment epithelialNeutral Protease: 2%DMEMChang CW, Roque RS, Defoe DM, and Caldwell RB.: An improved method for isolation and culture of pigment epithelial cells from rat retina, Curr Eye Res10(11), 1081, 1991
大鼠大鼠 (ACI/NMs X BUF/Mna) F1, 雄性, 28個 月EpthelialCollagenase Type 3: 0.1%Eagle's MEM Serum-freeMasuda, A., Ohtsuka, K., and Matsuyama, M.: Establishment of Functional Epithelial Cell Lines from a Rat Thyoma and a Rat Thymus, In Vitro Cell Dev Biol 26, 713, 1990
大鼠 (ACI/MNs) 雄性, 8周
大鼠大鼠, 費希爾344, 雄性, 8 周大,Tracheal epithelialPronase: 0.5%DMEMChang, L., Wu, R., and Nettesheim, P.: Morphological Changes in Rat Tracheal Cells During The Adaptive and Early Growth Phase in Primary Cell Culture, J Cell Sci74, 283, 1985
250-300 克
大鼠大鼠,費希爾, 雄性, 4-6 周EpithelialHyaluronidase: 0.1%HEPES BSSBabcock, M., Marino, M., Gunning, W., and Stoner, G.: Clonal Growth and Serial Propagation of Rat Esophageal Epithelial Cells, In Vitro 19, 403, 1983
Esophagus
大鼠大鼠, 費希爾, Lewis and SD, 雄性, 10-18 個月EpithelialTrypsin: 0.05%HBSS CMFHerring, A., Raychaudhuri, R., Kelley, S., and Iybe, P.: Repeated Establishment of Diploid Epithelial Cell Cultures from Normal and Partially Hepatectomized Rats,In Vitro 19, 576, 1983
大鼠大鼠, SD, 雌性Epithelial, cancer and tumorCollagenase: 0.1%Eagles's MEMCohen, L.: Isolation and Characterization of a Serially C*ted, Neoplastic, Epithelial Cell Line from the N-nitrosomethylurea Induced Rat Mammary Adenocarcinoma, In Vitro 18, 565, 1982
大鼠Wistar大鼠, 12 天EpithelialTrypsin: 0.05%HBSS, CMFMalan-Shibley, L., and Iype, P.: Influence of Cultures on Cell Morphology/Tyrosine Aminotransferase Levels, Exp Cell Res 131, 363, 1981
大鼠大鼠,費希爾, 成年的, 200-250 克EpithelialHyaluronidase: 0.0075%KCl-NaCl HEPES BufferWilliams, G., and Gunn, J.: Long-Term Culture of Adult Rat Liver Epithelial Cells,Exp Cell Res 89, 139, 1974
大鼠Fischer大鼠,  10 天Epithelial-likeTrypsin: 0.25%PBSWilliams, G., Weisburger, E., and Weisburger, J.: Isolation and Long-Term Cell Culture of Epithelial-Like Cells from Rat Liver, Exp Cell Res 69, 106, 1971

 

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4:價格公道,絕大部分價格有優(yōu)勢,當然不能保證100%產(chǎn)品都是,因為意味著沒有服務(wù).

5:良好的信譽,大部分客戶我們提供貨到付款服務(wù),客戶包括清華,北大 交大 復(fù)旦,中山等100多所大學,ROCHE,阿斯利康,國藥 ,fisher等500多家公司

6:我們還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc, Worthington Biochemical ,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. Dako,Inc, GePromegaridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,Worthington Biochemical , Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,FULLERLABS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等幾十家國外公司授權(quán)代理。
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